氧化磷酸化系列_ATP含量測試盒

測定方法：微量法

產品規格：100管/48樣

注    意：正式測定前務必取2-3個預期差異較大的樣本做預測定

測定意義：

ATP廣泛存在于動物、植物、微生物和培養細胞中，是生物能量通貨，能荷是描述細胞能量代謝狀態的主要參數。測定ATP含量并且計算能荷，能夠反映能量代謝狀態。

氧化磷酸化系列_ATP含量測試盒

測定原理：

肌酸激酶催化肌酸和ATP反應生成磷酸肌酸，可在700nm下用磷鉬酸比色法檢測磷酸肌酸含量，以此反應ATP含量。

自備儀器和用品：

分光光度計/酶標儀、水浴鍋、可調式移液槍、微量石英比色皿/96孔板、研缽和蒸餾水。

試劑組成和配制：

酸性提取液：液體60mL×1瓶，4℃保存；

堿性提取液：液體60mL×1瓶，4℃保存；

試劑一：粉劑×1支，4℃保存；臨用前加入1mL蒸餾水充分溶解待用；用不完的試劑分裝后-20℃保存，禁止反復凍融。

試劑二：液體1.5mL×1支，4℃保存；

試劑三：粉劑×1瓶，4℃保存；臨用前加入500μL蒸餾水充分溶解待用；用不完的試劑分裝后-20℃保存，禁止反復凍融。

試劑四：液體5mL×1瓶，4℃保存；

試劑五：液體25mL×1瓶，4℃保存；

標準液：液體10mL×1瓶，2μmol/mLATP標準液，4℃保存；

ATP提?。?/p>

1、血清（漿）中ATP的提?。喊凑昭澹{）體積（mL）：酸性提取液體積（mL）為1：5~10的比例（建議取約0.1mL血清（漿），加入1mL酸性提取液），進行冰浴勻漿，8000g 4 ℃離心10min；取上清液至另一EP管中，加入等體積的堿性提取液使之中和，混勻，8000g 4 ℃離心10min，取上清，置冰上待測（不可用于蛋白質含量測定）。

2、組織中ATP的提?。喊凑战M織質量（g）：酸性提取液體積(mL)為1：5~10的比例（建議稱取約0.1g組織，加入1mL酸性提取液），進行冰浴勻漿，8000g 4℃離心10min，取上清至另一EP管中，加入等體積的堿性提取液使之中和，混勻，8000g 4 ℃離心10min，取上清，置冰上待測（不可用于蛋白質含量測定）。

3、細胞或細菌中ATP的提?。合仁占毎蚣毦诫x心管內，棄上清，按照細菌或細胞數量（104個）：酸性提取液體積（mL）為500~1000：1的比例（建議500萬細菌或細胞加入1mL酸性提取液），超聲波破碎1min（冰浴，強度20％或200W，超聲2s，停1s），8000g 4 ℃離心10min；取上清液至另一EP管中，加入等體積的堿性提取液使之中和，混勻，8000g 4 ℃離心10min，取上清，置冰上待測（不可用于蛋白質含量測定）。