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氧化磷酸化系列_Na+k+ ——ATP酶測試盒

  • 更新時間:  2022-08-01
  • 產品型號:  100管/48樣
  • 簡單描述
  • 氧化磷酸化系列_Na+k+ ——ATP酶測試盒由上海紀寧生物公司提供,包括ATP酶檢測試劑盒說明書,免費代測,規格,包裝,品牌等關于有關本司測試盒所有產品的詳細介紹。
詳細介紹

氧化磷酸化系列_Na+k+  ——ATP酶測試盒

測定方法:微量法

產品規格:100管/48樣

注   意 :正式測定前務必取2-3個預期差異較大的樣本做預測定

測定意義:

Na+K+- ATP酶廣泛分布于植物、動物、微生物和細胞中,可催化ATP水解生成ADP和無機磷。

氧化磷酸化系列_Na+k+  ——ATP酶測試盒

測定原理:

Na+K+-ATP酶分解ATP生成ADP及無機磷,通過測定無機磷的量來確定ATP酶活性。

需自備的儀器和用品:

可見分光光度計/酶標儀、水浴鍋、臺式離心機、可調式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研缽、冰和蒸餾水。

試劑的組成和配制:

提取液:液體100mL ×1 瓶,4℃保存。

試劑一:液體 10mL×1 瓶,4℃保存。

試劑二:粉劑×1瓶,-20℃保存;臨用前加入6mL蒸餾水充分混勻待用;用不完的試劑分裝后-20℃保存,禁止反復凍融。

試劑三:液體 2mL×1 瓶,4℃保存。

試劑四:粉劑×1瓶,4℃保存。用時加入3mL蒸餾水, 4℃保存。

試劑五:粉劑×1瓶, 4℃保存。用時加入25mL蒸餾水,溶解后4℃保存一周。

試劑六:粉劑×1瓶, 4℃保存。用時加入25mL蒸餾水,溶解后4℃保存一周。

試劑七:液體25mL×1 瓶,室溫保存。

試劑八:10mmol/L 標準磷貯備液 10mL×1 瓶,4℃保存。

0.5μmol/mL 標準磷應用液配制:將試劑八 20倍稀釋,即取 0.1mL試劑八加1.9mL蒸餾水充分混勻。

定磷劑的配制:按H2O: 試劑五:試劑六:試劑七=2:1:1:1 的比例配制,配好的定磷劑應為淺黃色。若無色則試劑失效,若是藍色則為磷污染,定磷劑現用現配。

注意:配試劑最好用新的燒杯、玻棒和玻璃移液器,也可以用一次性塑料器皿,避免磷污染。

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樣品酶液的制備:

1、細菌、細胞或組織樣品的制備:

細菌或培養細胞:先收集細菌或細胞到離心管內,離心后棄上清;按照細菌或細胞數量(104個):提取液體積(mL)為500~1000:1的比例(建議500萬細菌或細胞加入1mL提取液),超聲波破碎細菌或細胞(冰浴,功率20%或200W,超聲3s,間隔10s,重復30次);8000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測。

組織:按照組織質量(g):提取液體積(mL)為1:5~10的比例(建議稱取約0.1g組織,加入1mL提取液),進行冰浴勻漿。8000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測。

2、血清(漿)樣品:直接檢測。


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