谷胱系列(GSH)S轉移酶(GST)測試盒_微量法

測定方法：微量法

產品規格：100管/96樣

注    意：正式測定之前選擇2-3個預期差異大的樣本做預測定。

測定意義：

GST是一種具有多種生理功能的蛋白質家族，主要存在于細胞質內。GST是體內解毒酶系統的重要組成部分，主要催化各種化學物質及其代謝產物與GSH的巰基共價結合，使親電化合物變為親水物質，易于從膽汁或尿液中排泄，達到將體內各種潛在或具備毒性的物質降解并排出體外的目的。因此，GST在保護細胞免受親電子化合物的損傷中發揮著重要的生物學功能。此外，因為GST具有GSH-Px活性，亦稱為non-Se GSH-Px，具有修復氧化破壞的大分子如DNA、蛋白質等的功能。注意，GST催化的反應減少GSH含量，但是不增加GSSG含量。

谷胱系列(GSH)S轉移酶(GST)測試盒_微量法

測定原理：

GST催化GSH與CDNB結合，其結合產物的光吸收峰波長為340nm；通過測定340nm波長處吸光度上升速率，即可計算出GST活性。

自備儀器和用品：

低溫離心機、水浴鍋、可調節移液器、紫外分光光度計/酶標儀、微量石英比色皿/96孔板、和蒸餾水。

試劑組成和配置：

試劑一：液體120mL×1瓶，4℃保存。

試劑二：液體22mL×1瓶，4℃保存。

試劑三：粉劑×1瓶，4℃保存。臨用前加2 mL蒸餾水溶解。

粗酶液提?。?br/>

1.組織：按照組織質量（g）：試劑一體積(mL)為1：5~10的比例（建議稱取約0.1g組織，加入1mL試劑一）進行冰浴勻漿。8000g，4℃離心10min，取上清置冰上待測。

2.細菌、真菌：按照細胞數量（104個）：試劑一體積（mL）為500~1000：1的比例（建議500萬細胞加入1mL試劑一），冰浴超聲波破碎細胞（功率300w，超聲3秒，間隔7秒，總時間3min）；然后8000g，4℃，離心10min，取上清置于冰上待測。

3.  血清等液體：直接測定。

測定：

1. 分光光度計/酶標儀預熱30 min，調節波長到340 nm，用蒸餾水調零。

2. 試劑三放在25℃（一般物種）或者37℃（哺乳動物）保溫。

3. 測定管：取微量石英比色皿或96孔板，加入20μL上清液，180μL試劑二和20μL試劑三，迅速混勻后于340nm測定吸光度變化，記錄10 s和310 s吸光度為A1和A2。