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ELISA試劑盒實驗室無菌操作注意事項
瀏覽次數:181發布日期:2022-10-25

注意事項:

1.ELISA試劑盒玻璃器皿的消毒和清潔

新購玻璃器皿的處理新購玻璃器皿應用熱番筧水洗刷,流水沖刷,再用1%~2%鹽酸溶液浸泡,以除去游離堿,再用水沖刷。對容量較大的器皿如試劑瓶、燒瓶或量具等,經清水洗凈后應注入濃鹽酸少量,漸漸轉動,使鹽酸布滿容器內壁數分鐘后傾出鹽酸,再用水沖刷。


2.污染玻璃器皿的處理

①一般試管或容器可用3%煤酚皂溶液或5%shi炭酸浸泡,再煮沸30分鐘,亦可用番筧或合成洗刷劑洗刷使盡量發生泡沫,然后用清水沖刷至無番筧停止。然后用少量蒸餾水沖刷。

②細菌培育用的試管和培育皿可先行集中,用1kg/cm2高壓滅菌15~30分鐘,再用熱水洗刷后,用番筧洗刷,流水沖刷。

③吸管運用后應集中于3%煤酚皂溶液中浸泡24小時,逐支用流水反復沖刷,再用蒸餾水沖刷。

④油蠟沾污的器皿,應單獨滅菌洗刷,先將沾有油污的物質棄去,倒置于吸水紙上,100℃烘干半小時,再用堿水煮沸,番筧洗刷,流水沖刷。必要時可用二jia苯祛污。

⑤染料沾污的器皿,可先用水沖刷,后用清潔或稀-鹽-酸洗脫染料,再用清水沖刷。一般染色劑呈堿性,所以不宜用番筧的堿水洗刷。

⑥玻片可置于3%煤酚皂溶液中浸泡,取出后流水沖刷,再用番筧或弱堿性煮沸,天然冷卻后,流水沖刷。被結核桿菌污染或不易洗凈的玻片,可置于清潔液內浸泡后再沖刷。


3.無菌器材和液體的準備

將玻璃用具中的培育皿、培育瓶、試管、吸管等按上述辦法洗凈烘干后,用一潔凈紙包好瓶口并把吸管尾端塞上棉花,裝入干凈的鋁盒或鐵盒中,于120℃的干燥箱中干燥滅菌2小時,取出備用。關于手術器械、瓶塞、工作服以及新制造的PBS洗液,則采用高壓蒸氣滅菌法,即在15磅的條件下,加熱20分鐘。而關于MEM培育液、小牛血清和消化液等需用G5或G6濾器負壓抽濾后運用。


4.在無菌操作過程中,重要的是要堅持工作區的無菌、清潔。

因而,在操作前20~30分鐘要先發動超凈臺和紫外燈,并認真洗手和消毒。在操作時,嚴禁喧鬧,嚴禁用手直接拿無菌物品,如瓶塞等,而必須用消毒的止血鉗、鑷子等。培育瓶應在超凈臺內操作,并且在開啟和加蓋瓶塞時需反復用酒精燈燒。關于吸管應先用手拿后1/3處,戴上膠皮乳頭,并用酒精燈燒烤之后再吸液體。


5.常用清潔液的制造法

①重鉻suan鉀清潔液:可根據不同需要,選用下列的任何一種濃度。先將重鉻suan鉀溶于水中,再漸漸參加濃硫酸。留意,此時可發生高熱,應避免容器決裂。重鉻suan鉀清潔液除污力強,腐蝕性大,應避免觸摸皮膚和衣服。為避免吸收空氣的水分而變質,此液應儲存于帶蓋的容器中。如清潔效能較差,可再參加少量重鉻suan鉀及濃硫酸,還可繼續運用。直到液體變藍綠色,即不能再用。制造重鉻suan鉀清潔液時,宜用耐高溫的陶瓷缸或耐酸琺瑯或塑料容器。運用玻璃器皿時,應特別留意避免發生高熱而決裂,切忌用量筒來制造。

②磷酸三鈉將其配成5%~10%水溶液,可用于洗刷玻璃器皿上的油污,但經常運用腐蝕玻璃,使器皿表面含糊、毛糙。


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